Фоспренил – структура, биологические свойства, клинические эффекты

Введение

Структура и биологические функции полипренолов

Полипренолы – полиизопреноидные спирты, относящиеся к классу терпеноидов. В живых организмах терпеноиды синтезируются за счет наращивания изопреноидной цепи путем последовательного присоединения к молекуле изопрена, (разветвленного ненасыщенного углеводорода из пяти углеродных атомов), дополнительных изопреновых звеньев. Полипренолы имеют от 5 до 30 – 40 звеньев. Фосфорилированные полипренолы - интегральные компоненты биологических мембран клеток всех живых организмов. Они определяют такие свойства клеточных мембран как текучесть, проницаемость и др., что влияет на скорость метаболических процессов в клетке (1). Эти соединения участвуют в процессе биосинтеза белков клеткой на стадии их созревания (посттрансляционной модификации) в процессе N-гликозилирования, осуществляя перенос олигосахаридов на определенные остатки аспарагиновой кислоты в синтезируемом белке. Линейная полипептидная цепь в процессе гликозилирования превращается в полноценный функциональный глобулярный белок со стабильной третичной структурой – гликопротеин (2). В организме гликопротеины выполняют множество функций: участвуют в формировании рецепторного аппарата клеток и надмембранных гликопротеиновых структур ( гликокаликса), обеспечивают функциональную активность секретируемых клеткой белков (гормонов, иммуноглобулинов, белков плазмы крови, за исключением альбуминов). При вирусной инфекции белки вируса собираются на системе синтеза белка зараженной клетки. У большинства вирусов, имеющих оболочку, белки оболочки гликозилированы. При их синтезе олигосахариды переносятся на аспарагин в последовательностях Asp-X-Ser/Thr (3). Для обеспечения функционирования вирусных гликопротеинов должна быть сформирована их третичная структура, которая стабилизируется присоединением олигосахаридных цепей по определенным сайтам связывания. Например, у гемагглютинина вируса гриппа к первой субъединице этого белка присоединены шесть олигосахаридных цепей, а ко второй - одна. Олигосахарид, присоединенный в позиции 165, стабилизирует контакты между глобулами на вершине структуры. Изменение третичной структуры вирусных гликопротеинов блокирует взаимодействие вируса с клеткой-мишенью. При дополнительном введении олигосахарида в позиции 63 молекула стерически маскируется (4). Правильно собранные вирусные гликопротеины обеспечивают фузионную активность вируса и его связывание с рецепторами клетки-мишени. Более того, в результате встраивания вирусных гликопротеинов в поверхностные структуры клетки-мишени, она начинает распознаваться и элиминироваться иммунной системой хозяина. В России изучение биологических эффектов фосфорилированных полипренолов начато в конце 80-х годов. Была показана их противовирусная активность как в культуре клеток (в отношении вируса чумы плотоядных), так и in vivo на модели клещевого энцефалита, а также при лечении чумы плотоядных, инфекционного гепатита и парвовирусного энтерита собак (5). Дальнейшие исследования фосфорилированных полипренолов подтвердили широкий спектр их биологической активности: снижение летальности на 60b% при гриппозной инфекции мышей (6); коррекцию вторичных иммунодефицитов мышей, вызванных стрессом и вирусной инфекцией (7); усиление иммунного ответа на антирабическую вакцину у мышей (7) и собак (8); повышение продукции макрофагальных цитокинов (интерлейкина 1, 6, 12 и фактора некроза опухолей альфа), а также интерферона в сыворотке крови мышей (9). Совокупность полученных данных позволила запатентовать фосфорилированные полипренолы как средство для профилактики и лечения инфекционных заболеваний и коррекции патологических состояний живого организма (10).

Материалы и методы исследований

В работе использован коммерческий препарат Фоспренил (0,4% раствор в комплексном растворителе), полученный на основе фосфорилированных полипренолов хвои. Коммерческий препарат (производство ЗАО «Микро-плюс») применяют в ветеринарной практике. Препарат имеет Наставление по применению, утвержденное Департаментом ветеринарии РФ, удостоверение государственной регистрации и сертификат соответствия. LD50 для Фоспренила составляет свыше 12500 мг/кг. Период полувыведения из сыворотки крови - 14 часов. Он практически безвреден, не является ксенобиотиком. Производство и сырье для него экологически безопасно. Препарат можно вводить на любой физиологической стадии развития организма животных (беременным, лактирующим, новорожденным, молодняку и др.). Убой животных после применения препарата проводят без ограничений по срокам.

Клинические испытания проводились в хозяйствах Московской области. Работа проведена на поголовье: КРС - 234 голов, свиньи - 658 голов, лошади - 101 голова, бройлеры - 40600 голов. Формировались опытные и контрольные группы животных. Ветеринарные обработки и технологические режимы были одинаковы для всех групп. В опытных группах дополнительно применяли Фоспренил. Для профилактики использовали малую дозу – 0,05 мл/кг (200 мкг/кг). Здоровым животным Фоспренил вводили с профилактической целью. Препарат инъецировали внутримышечно, однократно, или курсом по два введения через 48 часов в периоды возрастного физиологического иммунодефицита (у новорожденных на 1 и 3 дни жизни во время формирования системы естественной резистентности и иммунитета, и на 21 день жизни, когда начинает снижаться титр колостральных антител), в период интенсивного роста, во время воздействия иммунодепрессивных факторов и в период эпизоотологического неблагополучия. С целью повышения эффективности и безопасности вакцинации Фоспренил применяли в дозе 0,05 мл/кг одновременно c первым введением вакцины. Препарат и вакцину вводили в разных шприцах, в разные точки. Для лечения вирусных инфекций у продуктивных животных была использована средняя терапевтическая доза – 1,0 мл/кг (4 мг/кг), один раз день. При этом, с учетом периода полувыведения Фоспренила, уровень препарата в сыворотке крови не снижается ниже 1,6 мг/кг. Объем вводимого за одну инъекцию препарата в этом случае достаточно велик (11). Такой же уровень препарата в сыворотке крови можно получить при введении Фоспренила четыре раза в сутки в дозе 0,1 мл /кг. При этом уровень препарата в сыворотке крови также не снижается ниже 1,6 мг/кг. Схема и дозы были отработаны на собаках (12). Если ввести препарат четыре раза в сутки не удавалось, то его вводили в две точки или внутривенно (терапевтическая доза при этом снижалась в два раза). При пероральном (на корень языка) введении терапевтическую дозу увеличивали в 2 – 5 раз. В особо тяжелых случаях течения вирусных инфекций среднюю терапевтическую суточную дозу увеличивали в два раза. При применении препарата в дозах ниже средней терапевтической наблюдали отсутствие клинического эффекта и летальный исход. С терапевтической целью применение Фоспренила сочетали с общепринятой схемой терапии вирусных инфекций. Длительность курса лечения определялась клинической необходимостью. Лечение прекращали через 2 дня после исчезновения основных симптомов заболевания. При необходимости назначали повторные курсы лечения. Дополнительный клинический эффект давала обработка слизистых оболочек, которые являются «воротами инфекции» (промывание Фоспренилом глаз, носа, рта).

Побочных эффектов при применении Фоспренила у разных видов животных не обнаружено.

Противопоказания не выявлены. В случае повышенной индивидуальной чувствительности возможно повышение температуры тела на 0,5 ºС, не требующее отмены препарата.

Результаты комиссионных испытаний Фоспренила

По приказу ВГНКИ были проведены клинические испытания Фоспренила в хозяйстве неблагополучном по трансмиссивному гастроэнтериту свиней (ТГС). Для профилактики заболевания Фоспренил вводили: опытным свиноматкам в дозе 0,05 мл/кг внутримышечно, одновременно с живой аттенуированной вакциной против ТГС (ТР-1) на 80 и 100 дни супоросности. Введение осуществляли разными шприцами, в разные точки, с целью увеличения титров поствакцинальных антител. Поросятам, рожденным от опытных свиноматок, препарат вводили в той же дозе, внутримышечно, на 1, 3 и 21 дни жизни с целью повышения естественной резистентности в период физиологического иммунодефицита. У опытных свиноматок титр антител против ТГС на 10 день после опороса был в 5,4 раза выше, чем в контроле. У полученных от них поросят титр колостральных антител на 14 день жизни был в 2 раза выше, чем в контроле. В условиях вспышки ТГС у поросят опытной группы (142 животных до 7-дневного возраста) была зафиксирована более низкая заболеваемость (58 %). В контрольной группе (100 поросят того же возраста), заболеваемость составила 100 %. Более того, все поросята из опытной группы, не заболевшие ТГС (60 голов), равномерно развивались до отъема без падежа. К отъему сохранность поросят в контрольной группе составила 58 %, а в опытной группе – 73 %. У свиноматок, не получавших Фоспренил, рождались поросята, которые в условиях вспышки ТГС считались зараженными с момента рождения. Из таких поросят была сформирована опытная группа, в которой проводили терапию Фоспренилом в сочетании со стандартной схемой терапии, принятой в хозяйстве (антибиотики, витамины, пробиотики). Контрольные поросята Фоспренил не получали. Положительный клинический эффект был отмечен при введении Фоспренила в высоких дозах 5,0 мл/кг, непосредственно в ворота инфекции (перорально, на корень языка). Препарат вводили сразу после опороса, до наступления клинических признаков (13).

В результате клинических испытаний Фоспренила было установлено следующее:

1. Профилактический эффект. В неблагополучном по ТГС хозяйстве у чувствительного поголовья заболеваемость была снижена на 42 %;

2. Терапевтический эффект. Во время вспышки ТГС, падеж поросят был снижен на 13 %.

Результаты широких производственных испытаний Фоспренила

При введении препарата здоровым сельскохозяйственным животным с профилактической целью отмечали активизацию метаболических процессов, роста и развития, увеличения приростов живой массы, стимуляцию механизмов неспецифической защиты, повышение напряженности иммунитета при вакцинации у телят (14), поросят (15), цыплят-бройлеров (при этом снижены затраты корма на единицу продукции) (16). У КРС отмечено повышение титров поствакцинальных антител к возбудителям вирусных и бактериальных инфекций (17, 14). У лошадей Фоспренил предотвращал развитие респираторных инфекций в осенне-весенний период, повышал иммунный ответ при вакцинации от лептоспироза и снижал частоту поствакцинальных осложнений (18). У здоровых бройлеров, получавших Фоспренил на 1,3 и 21 дни жизни, при возникновении вспышки колибактериоза на 27 день жизни сохранность к убою была на 12% выше, чем в контроле (19) . При введении Фоспренила телятам морфологическая картина крови не изменялась, на 7 – 15,5 % повышалась бактерицидная активность сыворотки, в 1,5 – 3,5 раза увеличивалась активность фагоцитирующих клеток, на 6,5% возрастал уровень общего белка и на 14 % - уровень глюкозы (14). В результате широких испытаний было показано, что Фоспренил увеличивает сохранность, приросты и привесы, повышает эффективность и безопасность вакцинации, а при неблагоприятной эпизоотической ситуации - снижает заболеваемость. При введении препарата больным животным с терапевтической целью в составе комплексной терапии было отмечено снижение смертности, сокращение сроков лечения и предотвращение потерь массы у телят с вирусной диареей (11), ротавирусной инфекцией (20) и респираторно-кишечными вирусными инфекциями (21) при условии раннего начала лечения.

Обсуждение

Возможные механизмы терапевтического действия Фоспренила

1. Повышение продуктивности. Известно, что корректировка иммунологических показателей организма до состояния нормы приводит к значительному (до 10 – 30 %) повышению продуктивности у животных (22). В своих исследованиях мы также отметили, что применение Фоспренила приводит к повышению привесов у телят, поросят и бройлеров, если им вводили препарат в раннем возрасте и в период интенсивного роста. У бройлеров увеличивалось количество тушек первого сорта с 35 – 39 % мышечной ткани, состоящей на 90 % из белка (23). Таким образом, у молодых, растущих животных активизация функционирования системы естественной резистентности и иммунитета сопровождается увеличением роста и привесов, которое, возможно, коррелирует с увеличением синтеза белка в организме с помощью фосфорилированных полипренолов.

2. Профилактические свойства препарата. При применении Фоспренила с целью профилактики удается снизить заболеваемость и повысить сохранность чувствительного поголовья. Мы предполагаем, что профилактические эффекты Фоспренила связаны со стимулирующим действием препарата на систему естественной резистентности организма, основой которой являются факторы сыворотки, система естественной цитотоксичности и фагоцитирующие клетки (24). Проведенные клинические исследования показали, что введение Фоспренила животным, приводит к усилению общей бактерицидной активности сыворотки крови. Существенную роль в бактерицидную активность сыворотки вносят белки глобулиновой фракции, которые являются гликопротеинами. На синтез этих белков, как мы предполагаем, влияет Фоспренил. Естественную цитотоксичность осуществляют естественные киллерные клетки (ЕК-клетки). Распознавание и уничтожение ЕК-клетками мишеней происходит за 1 – 2 часа, не требует предварительной иммунизации, но при этом не образуется иммунологическая память (25). В нашей работе, на здоровых животных показано повышение активности естественных киллерных клеток через 4 часа после введения Фоспренила. Фагоцитарная система защиты осуществляется нейтрофилами и макрофагами (24). На основании клинических данных установлено, что у животных, получавших Фоспренил, регистрируется высокая степень завершенности фагоцитоза. Это, с одной стороны, вносит вклад в повышение естественной резистентности, а с другой стороны, весьма вероятно, повышает способность презентировать поступивший в организм антиген вместе с молекулами главного комплекса гистосовместимости Т-хелперам, которые стимулируют дифференцировку В-клеток в плазматические, продуцирующие антитела в ответ на введение вакцины. Это предположение подтверждается клиническими данными о повышении титров поствакцинальных антител в сыворотке крови животных при введении Фоспренила одновременно с вакциной. У таких животных титры антител были выше протективного уровня, и, соответственно, животные считались иммунологически защищенными от инфекции. Кроме этого на здоровых животных показано, что активированные Фоспренилом макрофаги продуцируют повышенный уровень цитокинов: интерлейкины 1 и 12, фактор некроза опухолей. Интерлейкины 1 и 12 относятся к иммуностимулирующим цитокинам. Фактор некроза опухолей вызывает лизис опухолевых, инфицированных вирусом и инвазированных паразитами клеток (26). Зарегистрированное повышение продукции указанных цитокинов свидетельствует об активизации иммунитета. Более того, при повышенной под влиянием Фоспренила продукции интерлейкина-1 этот цитокин выходит в системный кровоток и с током крови попадает в гипоталамус. Взаимодействуя там со специфическими рецепторами, он оказывает стимулирующее влияние на гипоталамус (27), который координирует нейро-эндокринно-иммунное взаимодействие, потенцирующее иммунный ответ в начальной (индуктивной) фазе (24). Таким образом, все указанные механизмы действия препарата вносят вклад в снижение заболеваемости и повышение сохранности поголовья.

3. Терапевтические свойства препарата. Показано, что эффективность комплексной терапии вирусных инфекций увеличивается при применении Фоспренила. Монотерапия Фоспренилом менее эффективна. Терапевтическая эффективность препарата не зависит от типа нуклеиновой кислоты вируса. Отмечены случаи излечения при инфекциях, вызванных ДНК-содержащими вирусами - поксвирусы (оспа свиней), герпесвирусы (ИРТ КРС) - и при инфекциях, вызываемых РНК-содержащими вирусами - парамиксовирусы (парагрипп-3 КРС) и ортомиксовирусы (грипп лошадей). Терапевтическая эффективность выше, а время лечения короче при острых респираторно-кишечных вирусных инфекциях. Длительность курса в таких случаях составляет 5 – 7 дней. Терапевтическая эффективность тем выше, чем раньше начато лечение. Особенно эффективно лечение в инкубационном периоде. Достаточно эффективно лечение и в период начала проявления клинических признаков. Полученные клинические данные по особенностям терапевтического применения Фоспренила коррелируют с экспериментальными исследованиями, проведенными на культуре клеток. При инфицировании культуры клеток вирусом инфекционного ринотрахеита КРС (ИРТ) в низкой заражающей дозе (3,75lg) в присутствии Фоспренила, удалось зафиксировать снижение вирулентности «урожая» вируса (21). Этот факт свидетельствует о том, что вирус, размножившийся в клетках-мишенях в присутствии Фоспренила, после выхода из нее не в состоянии заразить следующую клетку-мишень. Указанный эффект получен при низкой заражающей дозе, что соответствует клиническим данным о более эффективной терапии при раннем начале лечения. Исходя из биохимических свойств фосфорилированных полипренолов, мы предполагаем, что один из механизмов выявленной противовирусной активности Фоспренила вероятно связан с нарушением гликозилирования белков, входящих в суперкапсидную оболочку вирусной частицы. При этом может изменяться третичная структура гликопротеинов вируса и, следовательно, нарушаться их взаимодействие с рецепторами клетки-мишени. В пользу данной гипотезы свидетельствуют данные электронномикроскопического изучения вируса клещевого энцефалита, полученного в присутствии Фоспренила. Установлено, что среди вирусных частиц отмечаются вирионы с измененной оболочкой (28). Кроме этого, препарат влияет на устойчивость организма животных к вирусной инфекции, опосредованную собственными защитными системами организма. Важными факторами противовирусной защиты являются естественные киллерные клетки и интерфероны. При вирусной инфекции у экспериментальных животных введение Фоспренила приводило к увеличению активности естественных киллерных клеток в 1,6 раза и к увеличению продукциии интерферона на 3 и 7 сутки. Интерфероны при вирусном инфицировании осуществляют внутриклеточную ингибицию репродукции вирусов, удаление с помощью ЕК и ЦТЛ инфицированного материала, защиту окружающих незараженных клеток от возможного заражения (29). Наконец, введение Фоспренила при вирусной инфекции у экспериментальных животных приводит к увеличению продукции цитокинов (интерлейкинов 4 и 12). Эти цитокины восстанавливают баланс Th1 и Th2, нарушенный при вирусной инфекции (26). Таким образом, установленные механизмы противовирусной активности Фоспренила, вносят вклад в терапевтическую эффективность этого препарата при вирусных инфекциях.

Заключение и выводы

Полученные в клинической ветеринарной практике положительные данные соответствуют биологическим свойствам фосфорилированных полипренолов. Влияние их на синтез белков коррелирует с повышением приростов и привесов, влияние на активацию факторов неспецифической резистентности - со снижением заболеваемости и повышением сохранности. Влияние на степень завершенности фагоцитоза и, возможно, презентацию антигенов способствует повышению эффективности и безопасности вакцинации. Влияние на гликозилирование белков и на активацию факторов защиты от вирусной инфекции обосновывает возможность терапии острых вирусных инфекций на ранних стадиях заболевания (в составе комплексной терапии).

Экономическая эффективность

Экономическая эффективность профилактического применения Фоспренила в скотоводстве составляет 1,87 р., в свиноводстве - 5,7 р, у бройлеров – 16 р на 1 рубль затрат.

Summary

Phosprenyl - structure, biological properties, clinical effects Deeva A.V.Belousova R.V., Danilov L.L., Ozherelkov S.V., Tretjakova I.V., Vinogradova P.A., Zajtseva M.L., Sosnovskaja O.J., Bakulin I.N., Bogautdinov Z.F., Pronin A.V. The structure and biological properties of the new preparation obtained from phosphorylated polyprenols of conifer needle of a pine are described. Results of wide clinical trials of the medicine, the protocols of its application and doses are indicated. Phosprenyl has been used for increase of productivity, stimulation of innate immunity; increase of vaccination efficiency and at treatment of pigs, cattle, horses and broilers of viral infections of pigs, cattle, horses. Remedy was shown to reduce essentially a sick rate and costs of forage, to increase safety and accretions of alive mass. The economic efficiency of prophylactic using of Phosprenyl per 1 ruble of costs is 1.87 rubles in cattle breeding, 5.7 rubles in a swine breeding and 16.0 rubles at broilers. Possible mechanisms of a therapeutical action of the preparation are discussed.

Список литературы

1. Danilov L.L., Maltsev S.D., Deyeva A.V., at all «Phosprenyl: A novel drug with antiviral and immune modulating activity» Arch. Immunol. and Ther. Exper., 1997, v.44, №5-6,-6.

2. Кольман Я, Рем К.-Г., «Наглядная биохимия», М., «Мир», 2000, - 469 стр.

3. Hubbard S.C., Ivatt R.J. Synthesis and processing of asparagines-linked oligosaccharides, Annu. Rev. Biochem., 1981, 50, 555-583.

4. Wilson I.A., Skehel j.j., Wiley D.C. Structure of the haemagglutinin membrane glycoprotein of influenza virus, Nature (Lond.), 1981, 289, 366-373.

5. Санин А.В., Данилов Л.Л., Наровлянский А.Н. и соавт. Патент «Противовирусное средство» № 2005475 , Роспатент, 1991.

6. Pronin A., Ozerelkov S., Deyeva A., at all«Anti-viral activity of the Phosprenyl preparation at some experimental viral infections». Int. Islamic Med. J., 1996, v.1, №4, 5.

7. Ожерелков С.В. Автореф. док.дис.«Роль естественных иммуномодулирующих факторов в патогенезе экспериментальных вирусных инфекций», М., 2003,-40 стр.

8. Аржаев А.М., Ожерелков С.В., Данилов Л.Л. и соавт. «Препарат Фоспренл стимулирует вакцинальный иммунитет у собак при совместном введении с антирабической вакциной». Конф. по вет. медицине мелких домашних животных на Северном Кавказе, 1999, 6-7.

9. Narovlyansky A.N., Sanin A.V., Pronin A.V., at all. «Phosprenyl – antiviral drug with interferon-inducing and immune-modulatory activities». Eur. Cytokine Network, 1996, v.7, №3, 1.

10. Данилов Л.Л., Деева А.В., Мальцев С.Д. и соавт. Патент «Средство для профилактики и лечения инфекционных заболеваний и коррекции патологических состояний живого организма» № 2177788, 1998.

11. Деева А.В., Т.Н. Ракова, Т.П. Лобова и соавт. «Применение фоспренила при острых вирусных инфекциях телят», Ветеринария, 2004, 6, 15-17.

12. Деева А.В., Ожерелков С.В., Новиков А.Ю. и соавт. «Фоспренил – противовирусный препарат широкого спектра действия», Ветеринар, 1998,3, 15-21. т 15-21.

13. Деева А.В., Мищенко Н.К., Лобова Т.П. и соавт. «Применение Фоспренила для профилактики и терапии при ТГС », Ветеринария, 2 , 2002, 12-15.

14. Ракова Т.Н., Деева А.В. «Влияние Фоспренила на неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность телят», Воронеж, 1999.

15. Ракова Т.Н., Мельникова Н.В. «Коррекция метаболических процессов и иммунологического статуса поросят Фоспренилом» Конф. по ветеринарии, Воронеж, 166-167.

16. Головещенко А.А., Деева А.В., Головещенко К.А.и соавт., «Применение Фоспренила при откорме цыплят-бройлеров», Ветеринария,12, 2002, 14-16.

17. Иванов Н.В., Деева А.В., Красота А.Ю., и соавт. «Применение «Фоспренила» при специфической профилактике ПГ-3 крупного рогатого скота», в сб. «Научные основы технологии производства ветеринарных биопрепаратов, Шелково, 2002, 137-140.

18. Андреева М.В. «Повышение иммунного ответа на вакцины и снижение поствакцинальной реакции с использованием препарата Фоспренил». 4-я конф. научно-практическая конференция по болезням лошадей, М., 2003.

19. Деева А.В., Белоусова Р.В., Данилов Л.Л. и соавт. Применение фоспренила. Механизмыповышения продуктивности, профилактического и терапевтического действия. Ветеринария, 2004, №11, С.9-13.

20. Авакянц Б.М., Белоусова Р.В., Родин А.Н.,исоавт. «Опыт лечения ротавирусной инфекции телят.» Ветеринарный консультант, 2002, №14, С.8.

21. Красота А.Ю., Алексеева Н.Ю., Курбанбекова З.Д. и соавт. «Новые подходы к терапии респираторно-кишечных вирусных инфекций крупного рогатого скота с использованием препарата Фоспренил», в сб. технология производства биопрепаратов, Шелково, 2002,137-140.

22. Игнатов П.Е., Программа по обеспечению сохранности здоровья животных и повышению продуктивности, М., 2000, 24 стр.

23. Кармолиев Р.Х. Биохимия патологических процессов животных. М., 2000 г., 2, -167с.

24. Воронин Е.С., Петров А.М., Серых М.М. и соавт. Иммунология, М., Колос-пресс, 2002, 406

25. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология, М., Медицина, 2002, -534.

26. Воробьев А.А., Быков А.С. «Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии», М.,Медицинское информационное агентство, 2003, -233

27. Ройт А., Бростофф ДЖ., Миел Д. Иммунология, М., «Мир», 2000, -592

28. Ожерелков С.В., Сосновская О.Ю., Красота А.Ю., и соавт. «Особенности противовирусной активности Фоспренила в отношении вирусов домашних и сельскохозяйственных животных». Конф. ветеринария мелких домашних животных, Краснодар, 2001.

29. Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях. Цитокины и воспаление, 2004, т.3, №1, 3-6. Журнал "Ветеринария" 2004 г.